细胞培养超纯水的重要性

细胞培养行业的用水污染源有着多种多样的因素,如细菌、霉菌、酵母等。这些污染物通常都在肉眼可见的范围内,或是光学显微镜下能够看见的。然而化学来源以及污染源头都是其他的生物媒介进行影响同时也在培养过程中影响细胞生长以及形态方面,但是这些无法被裸眼观察出来,因此细胞培养用水中不含微生物、内毒素、无机离子以及各类有机复合物等方面都无法观察到。

本实验的目的是为了评估艾柯纯水系统生产的超纯水是否能够安全无恙地轻松用于细胞培养应用。在本研究中,我们以即用型培养基来培养细胞作为对照,同时分别用纯水处理设备生产厂家生产出来的水(UF水)和RO水来配制粉末培养基。在本应用指南中所使用的RO水数据是通过新一代高级系统的旧款模型而获得的。每个培养批次的结果用于评估由艾柯纯水处理设备生产厂家系统生产的水是否适合用于细胞的培养。

本实验中所使用的PER.C6细胞系来源于人成视网膜细胞,如今也应用于重组蛋白的表达和单克隆抗体(Mab生产)的制备,以及用于治疗性蛋白和单克隆抗体的生产。

本实验结果清楚地显示了用UF水配制的粉末培养基市场上在售的即用型培养基更加适合细胞系的培养。细胞系在用UF水配制的培养基中培养后的生长特征与对照组中用即用型培养基培养后的特征相似。此外,我们还观察到当实验在中进行时,细胞系样品在用UF水配制的培养基中培养与用RO水配制的培养基中培养相比,细胞生长更加良好。在这项实验中,细胞密度基本都变得很高,而O2不再是限制性因素。因此我们得出结论,RO水中因为有更高浓度的内毒素或无机盐,因此影响了细胞生长。

这些实验结果都通过在中培养细胞系而获得的单抗产量得到进一步验证与体现。细胞系在用实验室超纯水配制的培养基样品中培养能够获得最高的单抗产量,对照组(使用即用型培养基)的产量稍低。这两种情况的单抗产量都不同于RO水样品,在RO水样品中培养后单抗产量反而下降。